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微生物檢測培養基細節問題
一、稱取
用精度度0.01的電子天平稱取培養基所需藥品。先根據配方計算出配制一定量培養基所需各種成分藥品的量,然后用天平準確稱取。稱量時用稱量紙折疊成簸箕狀盛放藥品。稱量紙折疊方法如圖所示。
二、溶化
2.煮沸滅菌法
對含有不耐高溫物質的培養基,可使用此方法。
以過濾的方法除菌,用無菌操作技術,定量加入培養基。血液、抗生素可用無菌操作技術抽取,加入冷卻到50℃左右的培養基中。培養基含有不耐熱的物質時,可用此法。
滅菌融化的培養基冷卻到50℃后,倒入無菌干燥的培養皿中。培養基的溫度不能過高,否則容易在培養皿的內蓋上形成太多的冷凝水;溫度太低,培養基又容易凝固成塊,無法制成平板。倒平板時,應在靠近酒精燈火焰進行,以免外界的雜菌落入平板內,左手拿培養皿,右手拿三角瓶的底部,用左手的小指和手掌部位把三角瓶的棉塞拔下,灼燒瓶口,用大拇指和食指把培養皿蓋打開一條縫,至瓶口剛好伸入,倒入培養基,以鋪滿底為限,不超過培養皿高度的三分之一,迅速蓋好蓋,放在桌面上,輕輕地轉動培養皿,使培養基分布均勻,冷凝后即可。
培養基滅菌后仔細檢查一遍,發現有破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養基沾染,都要丟棄,不能再用。并測定其終pH。還需進行無菌檢查和效果檢查。無菌檢查是將滅菌后的培養基取1管(瓶)-2管(瓶),37℃恒溫培養1d~2d,確定無雜菌生長;效果檢查是用標準菌株接種在相關的培養基上檢查檢查菌的生長、形態及生化情況,與已知情況相符。兩種情況都合格,配制的培養基方可使用。
信息來源:食品伙伴網